BioPharma Media

Рубрика: СТАТЬИ

  • Генная терапия глухоты

    Генная терапия глухоты

    Главное

    «Акуос» (Akouos) анонсировала первые результаты клинической проверки генно-терапевтического лечения глухоты.

    После однократного применения экспериментальной генной терапии слух, утерянный с рождения вследствие генетической мутацией, полностью вернулся.

    Предполагается, что терапевтический эффект сохранится пожизненно.

    В начале декабря 2022 года «Илай Лилли» (Eli Lilly) купила «Акуос», основанную в 2016 году, за 487 млн долларов наличными, плюс обещание дополнительных выплат по мере достижения определенных клинических и регуляторных этапов. Совокупная сумма составляет максимум 610 млн долларов.

    Генной терапией потери слуха занимаются и другие игроки фармотрасли.

     

    Потеря слуха, связанная с мутацией гена OTOF

    Потеря слуха, будучи четвертой ведущей причиной инвалидности во всём мире, затрагивает приблизительно 6,8% населения планеты [1]. Каждый 500-й ребенок рождается с нарушением слуха, и где-то в половине случаев наблюдается двусторонняя глухота тяжелой или глубокой степени [2].

    Большинство случаев врожденной тугоухости вызвано генетическими отклонениями [2] [3]. Известно более чем 150 генов, свыше 6 тыс. мутаций которых приводят к глухоте [4].

    Вариации в аминокислотной последовательности гена OTOF, кодирующего мембраноассоциированный белок отоферлин (otoferlin), ответственны за 1–8% случаев врожденной несиндромальной (изолированной) потери слуха и являются основной причиной заболеваний профиля аудиторных нейропатий (ANSD) [5].

    В мире насчитывается приблизительно 200 тыс. человек с отоферлин-ассоциированной потерей слуха.

    Отоферлин — кальций-чувствительный белок, участвующий в везикулярном транспорте и экзоцитозе, которые затрагивают внутренние волосковые клетки (ВВК) улитки. Это важнейшие процессы для передачи сигнала от ВВК к волокнам слухового нерва [6]. ВВК и нейроны спирального ганглия образуют специализированные ленточные синапсы для передачи акустических сигналов с высокой временной точностью. Эта точность критична для некоторых аспектов слухового восприятия, включая локализацию звука и понимание речи [7].

    Мутации гена OTOF могут приводить к дефициту или нефункциональности белка отоферлина, что нарушает синаптическую передачу и вызывает связанную с отоферлином потерю слуха — аутосомно-рецессивную глухоту-9 (DFNB9). Заболевание обычно проявляется в виде тяжелой или глубокой нейросенсорной потери слуха (SNHL) с врожденным или доречевым началом [5].

    Впрочем, в литературе описано множество случаев нетипичных фенотипов слуховых нарушений при OTOF-мутациях, включая легко-умеренные [8] [9] [10] [11] [12], прогрессирующие [9] [13] [14], чувствительные к температуре [15] [16] [17] [18]. Последние возникают, когда слуховой порог изменяется в зависимости от колебаний температуры тела.

    Важно отметить, что пороги различения тонов, используемые для определения тяжести потери слуха, не всегда коррелируют с функциональными нарушениями. Как и при других формах ANSD, понимание речи при SNHL, связанной с отоферлином, может быть хуже, чем ожидается, исходя из порогов слышимости при менее тяжелых фенотипах [19] [20].

    Богатый фенотипический спектр отоферлин-ассоциированных SNHL является, вероятно, следствием разнообразия мутаций OTOF, которых уже насчитывается свыше двух сотен [20].

    На начальном этапе манифестации болезни ВВК, наружные волосковые клетки (НВК) и слуховой нерв развиваются нормально [21] [22] [23] [24] [25]. С течением времени компоненты улитки постепенно отмирают или теряют функциональность [26] [27] [28] [29] [13] [30].

    Первоначальное медицинское вмешательство при SNHL предполагает использование слуховых аппаратов [5]. Однако если звукоусиливающие НВК изначально не повреждены, дополнительное усиление звука слуховыми аппаратами может не компенсировать дисрегуляцию экзоцитоза в ленточном синапсе [28] [29] [16] [11]. Была также выдвинута гипотеза, что слуховые аппараты ускоряют гибель НВК посредством механизма акустической травмы [28] [13] [20].

    Кохлеарные имплантаты, напротив, приносят клиническую пользу большинству пациентов с отоферлин-ассоциированной SNHL, поскольку они обходят дисфункциональный ленточный синапс и стимулируют слуховой нерв напрямую [28] [31] [25].

    И, наоборот, пациенты с фенотипом ANSD (сохраненная отоакустическая эмиссия [ОАЭ]) и аномальные слуховые вызванные потенциалы ствола головного мозга [ABR]), вызванным постсинаптической дисфункцией, с меньшей вероятностью извлекут клиническую пользу от кохлеарной имплантации [32] [33].

    Решением всех этих проблем может стать генетическая терапия, восстанавливающая функциональность отоферлина в ВВК. Ее однократное применение должно навсегда вернуть утраченный слух пациентам с OTOF-связанной SNHL [34] [21] [20].

     

    Механизм действия

    AK-OTOF (AAVAnc80-hOTOF) — генная терапия на базе аденоассоциированного вирусного (AAV) вектора, предназначенная для восстановления слуховой функции путем переноса трансгена отоферлина (OTOF), закодированного кольцевой ДНК (кДНК), в ядра внутренних волосковых клеток (ВВК) с последующей длительной экспрессией нормального белка отоферлина.

    AK-OTOF, разработанный «Акуос» (Akouos), является двойной генной терапией. Поскольку размер трансгена OTOF выходит за пределы емкости AAV, созданы два различных рекомбинантных AAV-вектора: один содержит 5′-участок кДНК отоферлина, второй — ее 3′-участок. Оба вектора, которые вводятся одновременно, попадают в одно и то же ядро ВВК, где проходят межмолекулярную рекомбинацию с итоговым восстановлением полноразмерного трансгена отоферлина.

    AK-OTOF обращается к AAVAnc80, капсиду с высокоэффективной трансдукцией ВВК, и сильному универсальному промотору, который обеспечивает экспрессию отоферлина только в целевых ВВК на том уровне, который приводит к восстановлению физиологического слуха высокой остроты.

    AK-OTOF вводится интракохлеарно (внутрь улитки) специальным, минимально инвазивным хирургическим устройством.

    Однократное применение AK-OTOF обеспечивает пожизненную экспрессию трансгена OTOF, то есть полное излечение заболевания.

     

    Клинические подробности

    Продолжающееся клиническое исследование AK-OTOF-101 (NCT05821959) фазы I/II (нерандомизированное, открытое, многоцентровое, международное) изучает эффективность и безопасность генно-терапевтического лечения потери слуха из-за биаллельной мутации гена отоферлина — среди пациентов (n=14) в возрасте 2–17 лет.

    Результаты первого пациента (глухого с рождения 11-летнего мальчика) таковы.

    В течение 30 дней после двустороннего интракохлеарного введения AK-OTOF зафиксировано фармакологическое восстановление слуха на всех проверенных звуковых частотах и с достижением порогов уровня слышимости в пределах от 65 до 20 дБ. На некоторых частотах диапазон слышимости вернулся к полноценному физиологическому.

    Генная терапия и процедура хирургического вмешательства по ее доставке характеризовались приемлемой переносимостью. Серьезных нежелательных явлений не зарегистрировано.

     

    Что дальше

    На экспериментальном конвейере «Акуос» (Akouos) есть и другие генно-терапевтические препараты для лечения нарушений слуха. Они находятся на доклинической стадии разработки.

    Так, на волосковые клетки таргетирован AK-CLRN1 против синдрома Ашера типа IIIA, который вызывается мутацией гена CLRN1, кодирующего кларин-1.

    Поддерживающие клетки улитки выбраны в качестве мишени для генно-терапевтического лечения аутосомно-рецессивной несиндромальной глухоты (DFNB1), связанной с мутацией гена GJB2, кодирующего коннексин 26.

    Изучается генная терапия вестибулярной шванномы (акустической невромы): путем блокирования фактора роста эндотелия сосудов (VEGF).

     

    Рыночная обстановка

    Генно-терапевтическим лечением глухоты занимается ряд игроков фармотрасли.

    Так, в конце января 2024 года специалисты Фуданьского университета (Шанхай) и китайской «Рифрешджин терапьютикс» (Refreshgene Therapeutics) совместно с экспертами Массачусетской офтальмологической и отоларингологической больницы (MEE) отчитались об успехах продолжающегося клинического исследования ChiCTR2200063181 генной терапии тяжелой или полной глухоты из-за биаллельной мутации гена отоферлина (OTOF).

    По прошествии 26 недель после двустороннего интракохлеарного введения педиатрической популяции (1–18 лет) пациентов экспериментального генно-терапевтического препарата AAV1-hOTOF (RRG-003) у 83% участников (n=5/6), за которыми велись наблюдения, слуховая функция восстановилась. Хотя до лечения они страдали полной глухотой, о чем свидетельствовал порог слуховых вызванных потенциалов ствола головного мозга (ABR) свыше 95 дБ. Один испытуемый на лечение не ответил: возможно, по причине исходно высокого уровня нейтрализующих антител.

    Респонденты отметились снижением ABR-порога на 40–57 дБ в звуковом диапазоне 0,5–4,0 кГц, то есть начали слышать обычную беседу. Продемонстрированы значительное улучшение восприятия речи и восстановление способности вести нормальный разговор.

    AAV1-hOTOF представляет собой, по аналогии с AK-OTOF авторства «Акуос» (Akouos), двухвекторную генную терапию.

    Чуть ранее, в начале января 2024 года, китайская «Отовиа терапьютикс» (Otovia Therapeutics) поделилась положительными результатами лечения OTOF-ассоциированной глухоты при помощи экспериментальной двойной генной терапии OTOV101N + OTOV101, тестируемой в рамках клинического испытания NCT05901480. Через месяц слух двоих детей в возрасте 5 и 8 лет восстановился: у первого до нормального уровня, у второго до способности различать речь.

    «Десибел терапьютикс» (Decibel Therapeutics) продолжает клиническое исследование CHORD (NCT05788536) фазы I/II экспериментальной генной терапии DB-OTO потери слуха ввиду биаллельной мутации OTOF среди педиатрической популяции (возраст до 17 лет).

    Согласно раскрытым в конце октября 2023 года промежуточным данным, первый пациент (10-месячная девочка с глубокой потерей слуха), интракохлеарно получивший DB-OTO в одно ухо, в течение последующих 6 недель отметился явным улучшением слуховых реакций. После 12 недель порог слышимости опустился до 55 дБ — против исходных 100 дБ.

    На доклинических этапах разработки находятся генно-терапевтические препараты AAV.103 и AAV.104, предназначенные для лечения потери слуха, вызванной мутациями соответственно генов GJB2 (кодирует коннексин 26) и STRC (кодирует стереоцилин).

    В конце сентября 2023 года «Ридженерон фармасьютикалс» (Regeneron Pharmaceuticals) купила «Десибел» за авансовых 109 млн долларов наличными, плюс будущие выплаты по мере прохождения определенных этапов разработки и регуляторики. Совокупная сумма составляет максимум 213 млн долларов.

    В середине января 2024 года французская «Сенсорион» (Sensorion) приступила к клиническому исследованию Audiogene фазы I/II двухвекторной генной терапии SENS-501 (OTOF-GT) по доставке трансгена отоферлина в улитку детям в возрасте 6–31 месяцев.

    В начале июля 2022 года британская «Могрифай» (Mogrify) и японская «Астеллас фарма» (Astellas Pharma) договорились о совместной разработке регенеративной медицины in vivo для решения проблемы нейросенсорной тугоухости. Сотрудничество направлено на выявление новых комбинаций участвующих в клеточной дифференцировке транскрипционных факторов, чтобы запустить в улитке процесс формирования новых волосковых клеток.

     

    Экспертные комментарии

    Генная терапия глухоты, позволяющая полностью вернуть потерянный слух, — невероятно важное достижение медицинской науки. Тем не менее существует ряд проблем как технического, так и социального характеров.

    Во-первых, далеко не каждый случай потери слуха поддается генно-терапевтическому лечению. Главным образом речь идет об исправлении генетических мутаций, которые приводят к повреждению и/или потере сенсорных волосковых клеток и ассоциированных с ними слуховых нейронов в улитке и которые вызывают нейросенсорную потерю слуха (SNHL). В случае каких-либо глубоких и необратимых повреждений компонентов внутреннего уха генная терапия вряд ли поможет.

    Во-вторых, доставка лекарственного препарата в улитку — спиралевидную полость, расположенную близко к центру черепа, — еще та непростая задача.

    В-третьих, если терапевтический эффект со временем вдруг пропадет, генную терапию повторить затруднительно ввиду выработки нейтрализующих антител против аденоассоциированного вирусного (AAV) вектора, несущего лекарство. 

    Впрочем, выход есть: можно либо перед повторным применением препарата осуществить выведение нейтрализующих антител с помощью IgG-расщепляющей эндопептидазы, либо использовать другой AAV-серотип.

    Опять же, поскольку в улитке нет лимфатического дренажа, а кровообращение и микросреда улитки разделены гематолабиринтным барьером, это позволяет предположить, что внутреннее ухо относится к иммунопривилегированным органам, то есть не подвержено иммунному ответу. При этом, однако, тот же глаз, всегда считавшийся наделенным полной иммунной привилегией, таковым, как выяснилось, всё же не является: AAV-вектор индуцирует адаптивный иммунный ответ.

    В-четвертых, после постановки диагноза глухоты пациентам зачастую еще во младенчестве вживляют кохлеарный имплантат — медицинское устройство, воздействующее на слуховой нерв в целях компенсации потери слуха. Пусть оно и помогает слышать (на уровне, достаточном хотя бы для понимания речи), но всё равно не обеспечивает полного восприятия богатства звуков. Кохлеарный имплантат по ряду причин препятствует проведению генной терапии, хотя это не факт.

    В-пятых, важен возраст пациентов, подходящих для генной терапии. Как бы хорошо она ни работала, есть узкое временное окно, начиная с двух–трех лет, для обучения глухих разговорной речи — после пятилетнего возраста это почти невозможно.

    В-шестых, существует сообщество глухих, которые не считают себя нуждающимися в лечении. Так, некоторые глухие родители в буквальном смысле радуются, когда проверка слуха их новорожденного ребенка показывает, что он тоже глухой и может стать частью сообщества.

    Здесь можно провести параллель с «гордостью карликов»: многие пациенты с ахондроплазией наотрез отказываются лечить своих детей-карликов, хотя предложен соответствующий препарат — «Воксзого» (Voxzogo, восоритид). По мнению «маленьких людей», они «не поломаны», чтобы их «ремонтировать».

    Восоритид: первое лекарство против карликовости

    Ахондроплазию можно вылечить.

  • Kyverna Therapeutics: клеточная терапия против аутоиммунных заболеваний

    Kyverna Therapeutics: клеточная терапия против аутоиммунных заболеваний

    Главное

    Биотехнологический стартап «Кайвёрна терапьютикс» (Kyverna Therapeutics) собирается осуществить процедуру выхода на фондовой рынок (IPO).

    «Кайвёрна» разрабатывает клеточную терапию для лечения аутоиммунных заболеваний. Первоначальный фокус направлен на ревматологию (волчаночный нефрит, системный склероз) и неврологию (миастения гравис, рассеянный склероз).

    Основным препаратом-кандидатом является KYV-101 — аутологичная CAR-T-терапия против B-лимфоцитарного антигена CD19, истощающая пул патологических B-лимфоцитов.

    Совместно с «Интеллиа терапьютикс» (Intellia Therapeutics) ведутся работы над KYV-201, аллогенным CAR-T-препаратом против CD19, который, опираясь на конструкцию KYV-101, проходит генное редактирование CRISPR-Cas9.

    Попутно исследуется лечение других аутоиммунных состояний, включая воспалительные заболевания кишечника (болезнь Крона, язвенный колит). Предприятие также занимается регуляторными T-клетками и гуманизированными CAR-конструкциями следующего поколения.

    «Кайвёрна», основанная в июне 2018 году под именем «Бейт терапьютикс» (Bait Therapeutics), уже привлекла 170 млн долларов инвестиционного капитала.

    CAR-T-терапия против аутоиммунных заболеваний: впечатляющие успехи

    Системная красная волчанка, идиопатический воспалительный миозит, системный склероз — все эти и другие аутоиммунные патологии можно полностью вылечить.

     

    Теория

    Аутоиммунные заболевания возникают в результате иммунного ответа, направленного не против патогенных клеток, а против собственных клеток и тканей организма. У здорового человека иммунные клетки, такие как В-клетки и Т-клетки, распознающие нормальные клетки и ткани и способные причинить вред, либо уничтожаются до своего созревания, либо их активность подавляется другими механизмами. Однако у пациентов с аутоиммунными состояниями подобные упреждающие меры не срабатывают из-за сочетания генетических особенностей и воздействия определенных антигенов, вызванных инфекциями или окружающей средой.

    Свыше 80 заболеваний классифицированы как аутоиммунные, и, к примеру, в США ими страдает до 8% населения. Распространенность аутоиммунных заболеваний продолжает расти. Так, за минувшие 25 лет в американской популяции отмечен 44-процентный рост наличия антинуклеарных антител (AAN), специфичных при системной красной волчанке. Такие аутоантитела являются ранним признаком аутоиммунной патологии, которая клинически манифестирует приблизительно в 30% случаев в течение пяти–десяти лет.

    Оценочно, в 2021 году мировой объем продаж препаратов для лечения аутоиммунных заболеваний превысит 80 млрд долларов. Однако по-прежнему велика медицинская потребность в новых лекарственных средствах, поскольку существующий терапевтический арсенал помогает далеко не всегда.

    Показателен пример ритуксимаба (rituximab), моноклональнального антитела против B-лимфоцитарного антигена CD20, работающего посредством истощения B-клеточного пула. Ритуксимаб неплохо справляется с ревматоидным артритом, пузырчаткой обыкновенной, АНЦА-ассоциированным васкулитом, однако это происходит не с каждым аутоиммунным заболеванием: системная красная волчанка, воспалительный миозит, аутоиммунный гепатит — контролю не поддаются. Это связано, возможно, с недостаточной эффективностью анти-CD20-антител ввиду их слабого проникновения в ткани.

    Хотя специфичность как аутоантигенов, так и ткани или органа с наиболее выраженной патологией различны при разных аутоиммунных заболеваниях, выработка аутоантител B-клетками является общей чертой для многих из них. Подобная схожесть открывает возможность универсального лечения путем воздействия на аутореактивные B-клетки.

    «Кайвёрна терапьютикс» (Kyverna Therapeutics) взяла на вооружение клеточную терапию в лице аутологичного CAR-T-препарата KYV-101, таргетированного на B-лимфоцитарный антиген CD19.

    CD19 — хорошо изученная мишень: одобрен ряд соответствующих CAR-T-препаратов, предназначенных для лечения гематоонкологических заболеваний. Вот эти лекарства: «Кимрая» (Kymriah, тисагенлеклейцел), «Йескарта» (Yescarta, аксикабтаген цилолейцел), «Текартус» (Tecartus, брексукабтаген аутолейцел), «Бреянзи» (Breyanzi, лисокабтаген маралейцел). Они успешно справляются с весьма запущенными онкопатологиями, не отвечающими на стандартную терапию: путем деплеции B-клеток, экспрессирующих CD19, причем как злокачественных, так и здоровых.

    KYV-101, истощающий B-лимфоцитарный пул, лицензирован в конце мая 2021 года у Национальных институтов здравоохранения США (NIH). В ходе создания этого препарата был сделан упор на улучшение переносимости в целях снижения частоты серьезных нежелательных явлений (НЯ), включая неврологическую токсичность (энцефалопатия, тремор, дисфазия) и синдром выброса цитокинов (CRS), — расхожих для любой CAR-T-терапии.

    Для этого конструкция KYV-101, закодированная самоинактивирующимся лентивирусным вектором (LSIN), собрана из полностью человеческих компонентов, таких как CD19-связывающий домен одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv) моноклонального антитела, шарнирный и трансмембранный домен CD8α, костимулирующий домен CD28, активирующий домен CD3ζ.

    Клиническое исследование NCT02659943 фазы I, осуществленное NIH, изучило KYV-101 (Hu19-CD828Z) в лечении взрослых пациентов (n=20) с B-клеточной лимфомой. При сохранении мощной и стойкой терапевтической эффективности подтверждено резкое снижение иммуногенности, нейротоксичности и выработки воспалительных цитокинов — по сравнению с другими CAR-T-препаратами.

     

    Практика

    Волчаночный нефрит

    «Кайвёрна терапьютикс» (Kyverna Therapeutics) остановилась на волчаночном нефрите (ВН) в качестве первого терапевтического показания для KYV-101 по причине хорошо идентифицируемой популяции пациентов и возможности выбора объективных клинических конечных точек эффективности лечения, необходимых для получения регуляторного одобрения.

    Хотя между пациентами с системной красной волчанкой (СКВ) и ВН существует значительное совпадение, учитывая, что в 50–75% случаев СКВ по ходу течения болезни развивается ВН, общеизвестно, что СКВ и связанные с ней показатели индекса активности системной красной волчанки (SLEDAI-2K) характеризуются вариабельностью в оценках, сделанных врачом. С другой стороны, протеинурия служит биологическим маркером активности ВН и потенциального повреждения почек, а также представляет собой более объективную конечную точку, с помощью которой можно оценить потенциальные клинические преимущества KYV-101.

    Продолжаются два клинических исследования, KYSA-1 (NCT05938725) фазы I (нерандомизированное, открытое) и KYSA-3 фазы I/II, в которых KYV-101 проверяется в лечении рефрактерного волчаночного нефрита среди взрослых пациентов (n=12 и n≈32). Одной из конечных точек выбрана частота полного почечного ответа (CRR): расчетная скорость клубочковой фильтрации eGFR > 20 мл/мин/1,73 м2 и соотношение белка и креатинина в моче (UPCR) < 0,2 мг/мг.

    На дату конца 2023 года, согласно результатам первых трех человек, назначение KYV-101 обеспечило быструю и глубокую деплецию B-клеток CD19+, что отразилось улучшением UPCR: до 0,5, 0,6 и 1,1 мг/мг — по прошествии соответственно 120, 30 и 27 дней. Со временем B-клеточный пул начинал восстанавливаться: у пациента #1 к 56-му дню.

    Пациент #1, у которого СКВ была диагностирована девять лет назад, а ВН класса IV характеризовался персистирующей протеинурией, не поддававшейся коррекции микофенолатом мофетилом, циклофосфамидом, такролимусом, сиролимусом, ритуксимабом, белимумабом и глюкокортикоидами, по итогам отказался от всей иммуносупрессивной терапии — за исключением 10-мг преднизона, прием которого также был прекращен на 31-й день.

    KYV-101 характеризовался приемлемой переносимостью. Синдром выброса цитокинов (CRS) в легкой форме, с которым столкнулись два испытуемых, был успешно купирован парацетамолом. Случаев синдрома нейротоксичности, связанной с иммунными эффекторными клетками (ICANS), или других серьезных нежелательных явлений (НЯ) не зарегистрировано.

     

    Системный склероз

    Поскольку считается, что патогенез системного склероза (системной склеродермии) обусловлен B-клетками, было выдвинуто предположение, что ритуксимаб (rituximab), моноклональное антитело против B-лимфоцитарного антигена CD20, предоставит должный терапевтический эффект. Однако клинические результаты применения ритуксимаба оказались неоднозначными: одни отчеты свидетельствовали о значительном эффекте, другие заключали, что он не лучше, чем стандартное лечение [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13].

    Как полагает «Кайвёрна», слабая активность анти-CD20-терапии моноклональными антителами является результатом недостаточного истощения B-клеточного пула.

    Согласно одному опубликованному отчету, пациент с рефрактерным к лечению системным склерозом, сопровождающимся фиброзом кожи, легких и сердца, а также запястным артритом, был пролечен экспериментальными CAR-T-клетками против CD19. Через три месяца уровень аутоантител определяться перестал, фиброз легких и сердца и их функция оставались стабильными, число пораженных артритом болезненных суставов уменьшилось с 22 до трех [14].

    Положено начало клиническому исследованию KYSA-5 фазы I/II (нерандомизированному, открытому, многоцентровому), которое тестирует KYV-101 среди взрослых пациентов (≈21) с диффузным кожным системным склерозом. Одна из конечных точек эффективности лечения заявлена изменением пересмотренного индекса составного ответа при системном склерозе (rCRISS) по прошествии 52 недель.

     

    Миастения гравис

    Лечение миастении гравис представлено широким ассортиментом препаратов, включая ингибиторы ацетилхолинэстеразы, кортикостероиды, иммуносупрессоры (циклоспорин, микофенолат, азатиоприн). Их назначение связано с риском серьезных нежелательных явлений (НЯ).

    Арсенал биологических препаратов, характеризующихся лучшей переносимостью, весьма приличен: «Солирис» (Soliris, экулизумаб), «Ултомирис» (Ultomiris, равулизумаб), «Зилбриск» (Zilbrysq, зилукоплан), «Ристигго» (Rystiggo, розаноликсизумаб), «Вивгарт» (Vyvgart, эфгартигимод альфа) и «Вивгарт Хайтруло» (Vyvgart Hytrulo, эфгартигимод альфа + гиалуронидаза).

    При тяжелых обострениях миастении гравис обращаются к внутривенным иммуноглобулинам (IVIG) и плазмаферезу.

    По мнению «Кайвёрна», разумно отойти от хронического лечения миастении гравис, обратившись к однократному вливанию CAR-T-клеток против CD19.

    Так, согласно результатам одной пролеченной при помощи KYV-101 пациентки, заболевание которой было тяжелым и рефрактерным к разнообразной терапии (экулизумабу, бортезомибу, даратумумабу, эфгартимоду), а сама она испытывала трудности с глотанием и дыханием, не могла самостоятельно ходить и неоднократно попадала в отделение интенсивной терапии, по прошествии 62 дней уровень патогенных аутоантител снизился на 70% при сохранении защитных титров иммуноглобулина G (IgG), полученных в результате вакцинации против столбняка, ветряной оспы, краснухи, паротита и кори. Серологические результаты сопровождались улучшением мышечной силы и ослаблением утомляемости, пациентка начала самостоятельно ходить [1].

    Другой случай лечения миастении гравис еще более показателен. В течение двух месяцев после применения KYV-101 пациентка с миастенией гравис, прежде прикованная к инвалидному креслу, стала ездить на велосипеде, а через четыре месяца — заниматься горным туризмом [2].

    Ожидается запуск клинического исследования KYSA-6 фазы II (нерандомизированного, открытого, многоцентрового) среди взрослых пациентов (n≈20) с миастенией гравис.

    Примечательны результаты стороннего клинического испытания MG-001 (NCT04146051) фазы Ib/II, организованного «Картижен терапьютикс» (Cartesian Therapeutics), которая разработала аутологичную CAR-T-терапию, нацеленную на B-клеточный антиген созревания (BCMA) и ориентированную на лечение миастении гравис. Экспериментальный препарат Descartes-08 построен на базе мРНК (rCAR-T), а не ДНК: он не требует предварительного химиотерапевтического кондиционирования для лимфодеплеции, характеризуется предсказуемой и контролируемой фармакокинетикой, избавлен от риска геномной интеграции [3].

     

    Рассеянный склероз

    Препарат «Окревус» (Ocrevus, окрелизумаб), моноклональное антитело против В-лимфоцитарного антигена CD20 авторства «Рош» (Roche), кардинальным образом обновил парадигму лечения рассеянного склероза (РС). Тем не менее приблизительно 18% пациентов, проходящих терапию окрелизумабом (ocrelizumab), по-прежнему сталкиваются с рецидивами, а 10% — с прогрессированием РС.

    В любом случае таргетирование на CD20, осуществляемое этим препаратом, изменяющим течение рассеянного склероза (ПИТРС), однозначно подтвердило ключевую роль истощения пула B-лимфоцитов.

    «Окревус» (Ocrevus, окрелизумаб).
    «Окревус»: воодушевление не ослабевает. Но есть нюансы

    Немецкие врачи проанализировали окрелизумаб. Его безоговорочная эффективность имеет рамки.

    «Кайвёрна» считает, что применение KYV-101 отразится должным терапевтическим ответом при РС: благодаря способности CAR-T-клеток к более глубокому, чем моноклональные антител, проникновению в ткани, что способствует росту потенциала перезагрузки иммунной системы и уничтожения патогенных B-клеток.

    Согласно доклиническим исследованиям, CAR-T-клетки против CD19 в мышиной B-клеточно-зависимой модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (EAE), который реагирует на истощение B-клеток аналогичным образом, наблюдаемым при применении анти-CD20-антител при РС, основательно истощали B-клеточный пул в периферических тканях и центральной нервной системе [1].

    На дату конца 2023 года два пациента с РС прошли лечение при помощи KYV-101. Не зафиксировано случаев ICANS, один человек столкнулся с CRS в легкой форме.

    В феврале 2024 года будет запущено организованное Стэнфордским университетом клиническое исследование NCT06138132 фазы I (нерандомизированное, открытое), которое проверит KYV-101 в лечении нерецидивирующего и прогрессирующего РС у взрослых пациентов (n=12).

    «Кайвёрна» готовится к старту клинического испытания KYSA-7 фазы II (нерандомизированного, открытого, многоцентрового), которое изучит KYV-101 среди взрослых пациентов (n≈120) с РС. Первичная конечная точка установлена подтвержденным прогрессированием инвалидизации (CDP).

  • Metagenomi: метагеномика на службе биотехнологий

    Metagenomi: метагеномика на службе биотехнологий

    Главное

    Биотехнологический стартап «Метаджиноми» (Metagenomi) собирается привлечь до 100 млн долларов в ходе первичного размещений акций (IPO).

    «Метаджиноми», основанная в начале 2018 года, разрабатывает лекарственную терапию на базе обширного инструментария метагеномного редактирования генома.

    Ранее «Метаджиноми» удалось привлечь 457 млн долларов венчурного капитала.

    Метагеномика представляет собой раздел молекулярной генетики, изучающий генетический материал, полученный непосредственно из образцов окружающей среды или клинических образцов методом секвенирования. Метагеномика изучает набор генов всех микроорганизмов, находящихся в образце среды, — метагеном. Эту широкую область также можно назвать геномикой окружающей среды, экогеномикой, геномикой сообществ или микробиомикой.

    Благодаря своей способности выявлять ранее скрытое разнообразие микроскопической жизни, метагеномика предлагает мощный способ понимания мира микроорганизмов, который может произвести революцию в понимании биологии.

     

    Теория

    «Метаджиноми» (Metagenomi) поставила на метагеномику, преследуя масштабную цель разобраться с четырьмя миллиардами лет эволюции микроорганизмов, чтобы обнаружить и разработать набор новых инструментов редактирования, способных исправить любой тип генетической мутации, обнаруженной в любом месте генома человека.

    «Метаджиноми» проанализировала свыше 460 трлн пар оснований и предсказала более 7,4 млрд белков, включая 1,75 млн коротких палиндромных повторов, регулярно расположенных группами (CRISPR), и 322 млн CRISPR-ассоциированных (CAS) белков, что, судя по оценкам, привело к идентификации свыше 20 тыс. новых систем редактирования генома. Одновременно собраны обширные библиотеки из миллионов нуклеаз, дезаминаз, обратных транскриптаз, и CRISPR-ассоциированных транспозаз (CAST).

    В распоряжении «Метаджиноми» находится комплексный набор инструментов для редактирования генома, включающий программируемые нуклеазы, редакторы оснований, опосредованные РНК и ДНК системы интеграции, в том числе системы прайм-редактирования и CAST.

    Разнообразный и модульный инструментарий в арсенале «Метаджиноми» позволяет получить доступ ко всему геному и выбрать оптимальный инструмент для раскрытия всего потенциала его редактирования в случае конкретной болезни.

    Программируемые нуклеазы. Тысячи CRISPR-нуклеаз помогают выбрать идеальную систему для сайт-специфического нацеливания на любую генетическую мишень с преодолением основного ограничения систем CRISPR первого поколения. Для модификации генома программируемые нуклеазы создают целевые геномные разрывы, запускающие пути репарации ДНК. Это позволяет интегрировать ген в целевой участок (нокин) или деактивировать ген (нокдаун).

    Ультрамалые нуклеазы способны снять ограничения по размеру доставляемой полезной нагрузки in vivo, характерные для нуклеаз первого поколения. Они в несколько раз меньше по размеру и легко упаковываются в один аденовирусный вектор (AVV), по эффективности доставки обходя традиционные липидные наночастицы (LNP).

    Редакторы оснований, будучи самыми маленькими из известных CRISPR-редакторов оснований, ориентированы на однонуклеотидные изменения и совместимы с различными технологиями доставки, в том числе AVV.

    РНК-опосредованные интеграционные системы (RIGS) осуществляют программируемые геномные модификации, закодированные в матричных РНК (мРНК). Платформа RIGS позволяет вносить в геном как небольшие правки (прайм-редактирование), так большие, включая вставки, делеции и все типы точечных мутаций.

    CRISPR-ассоциированные транспозазы (CAST) для сложных генных интеграций. Направленная интеграция ДНК во многом считается конечной целью корректирующего редактирования генома. Технология пригодна для лечения комплексных генетических заболеваний, вызванных мутациями с потерей функции, когда для устранения всех мутаций потребовались бы вставки размером более 10 тыс. пар оснований.

    Все экспериментальные наработки «Метаджиноми» находятся на доклинической стадии. Но это помешало предприятию получить поддержку со стороны таких грандов отрасли, как «Байер» (Bayer), «Модерна» (Moderna), «Ново Нордиск» (Novo Nordisk), «Айонис фармасьютикалс» (Ionis Pharmaceuticals).

    Среди широкого спектра заболеваний, на лечение которых направлена экспертиза «Метаджиноми»: гемофилия A, боковой амиотрофический склероз, мышечная дистрофия Дюшенна, муковисцидоз, сердечно-сосудистые нарушения, онкопатологии, аутоиммунные состояния.

     

    Практика

    Уместно рассмотреть несколько практических внедрений «Метаджиноми» (Metagenomi), которые позволяют объективно судить об уровне ее биотехнологической экспертизы в области метагеномики.

     

    MG29-1

    Нуклеаза spCas9, входящая в состав CRISPR-систем типа II, является основой для многих инструментов редактирования генов. «Метаджиноми» открыла MG29-1 — новую нуклеазу типа V, происходящую из бактериального генома, найденного в глубоководном гидротермальном источнике. MG29-1 располагает более высоким уровнем специфичности и уникальными последовательностями мотивов, примыкающих к протоспейсеру (PAM), что позволяет ей получать доступ к целевым участкам генома, до которых Cas9 добраться не в состоянии.

    Продемонстрирована высокая эффективность, с которой MG29-1 редактирует гены в первичных клетках человека in vitro, а также у мышей и нечеловеческих приматов. Доклинически подтверждены безопасность и эффективность терапевтического нокдауна генов. Скрининг in silicon и расщепление in vitro не выявили внецелевых действий MG29-1.

     

    Ультрамалые нуклеазы

    Доставка полезной нагрузки в ходе редактирования генома зачастую ограничена емкостью средства доставки. Вот почему необходимы новые нуклеазы, которые значительно меньше существующих систем.

    Длина популярных систем CRISPR-Cas9 типа II, производных Streptococcus pyogenes (SpCas9), — приблизительно 1300 аминокислот, тогда как длина некоторых новых нуклеаз, открытых «Метаджиноми», — чуть более 450 аминокислот. Подобная компактность несет ряд неоспоримых преимуществ для доставки, производства и дозирования. Их можно доставлять в органы и ткани, в настоящее время доступные только посредством аденовирусных векторов (AAV). Потенциально открываются показания, выходящие за рамки доставки в печень.

    «Метаджиноми» назвала такие нуклеазы, включая Cas типа II и V, SMART-нуклеазами (small arginine-rich systems, малые аргинин-насыщенные системы).

     

    Муковисцидоз

    Одной из проблем разработки прецезионного лечения муковисцидоза является большой размер гена муковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости (CFTR) и разнообразные мутации в нем, которые приводят к снижению экспрессии белка, потере функции, неправильному фолдингу и некорректной локализации в клетке.

    Нынешние терапевтические усилия требуют индивидуальных подходов, адаптированных к определенным CFTR-мутациям. Несмотря на то что ряд таких одобренных препаратов — «Трикафта» / «Кафтрио» (Trikafta / Kaftrio, элексакафтор + тезакафтор + ивакафтор, ивакафтор), «Симдеко» / «Симкеви» (Symdeko / Symkevi, тезакафтор + ивакафтор, ивакафтор), «Оркамби» (Orkambi, лумакафтор + ивакафтор) и «Калидеко» (Kalydeco, ивакафтор) — улучшают функциональные показатели легких, не все пациенты имеют мутации, поддающиеся CFTR-таргетированию. Ни одно из существующих лекарств не дает истинного излечения от мутации CFTR-гена, лежащего в основе заболевания, и пациенты продолжают страдать от заболеваемости и смертности в результате прогрессирования муковисцидоза.

    «Трикафта» / «Кафтрио»: первая в мире тройная терапия муковисцидоза

    Комбинированное лекарство поможет почти всем пациентам с муковисцидозом.

    «Метаджиноми» поставила перед собой цель полного излечения муковисцидоза, одномоментного и подходящего большинству пациентов. Предполагается, что этого можно достичь путем интеграции функциональной версии гена CFTR в геном базальных стволовых клеток легких (бронхиолоальвеолярных стволовых клеток). Редактирование стволовых клеток, являющихся источником постоянного обновления дифференцированных клеток, гарантирует, что внедренный функциональный CFTR-ген не будет со временем потерян из-за отмирания дифференцированных эпителиальных клеток — места экспрессии CFTR, дефектного при муковисцидозе.

    Технология Big RIGS и система CAST располагают должным потенциалом для интеграции больших фрагментов ДНК (в данном случае кодирующих ген CFTR) в определенный участок генома. При использовании Big RIGS ген CFTR доставляется в виде РНК, которая подвергается обратной транскрипции в ДНК, чтобы предоставить матрицу ДНК для интеграции. В случае с CAST ген CFTR доставляется в виде двухцепочечной ДНК, которая распознается системой CAST и интегрируется в нужный участок под действием транспозазы. Теоретически доставка в базальные стволовые клетки легких может быть осуществлена путем внутривенного введения, в том числе невирусного.

    Преимущество системы Big RIGS состоит в том, что для ее доставки можно использовать только РНК, упакованных в хорошо изученные липидные наночастицы (LNP). Доставка ДНК, необходимая для системы CAST и обращающаяся к невирусным векторам, изучена не слишком, и основным ее препятствием является транзит ДНК в ядро. Впрочем, «Метаджиноми» уже продемонстрировала доставку двуцепочечной ДНК размером 4,6 килобаз в ядра клеток печени мышей с помощью внутривенного введения LNP.

     

    Гемофилия A

    Появление генно-терапевтического лечения тяжелой гемофилии A в лице препарата «Роктавиан» (Roctavian, валоктокоген роксапарвовек) предоставило шанс на избавление от утомительного бремени пожизненного лечения. Аденовирусный вектор (AAV) доставляет в организм трансген фактора свертывания крови VIII (FVIII), запускающий эндогенную выработку последнего, который при гемофилии A недостаточно активен или дисфункционален в коагуляционном каскаде.

    «Роктавиан»: генная терапия гемофилии A

    Одно вливание валоктокогена роксапарвовека может полностью вылечить гемофилию A.

    После трансдукции клеток печени трансген FVIII находится в эписомальном состоянии (то есть не интегрирован в геном), где он транскрибируется, начиная с искусственно созданного экзогенного промотора, для производства матричной РНК (мРНК) FVIII, которая транслируется в белок FVIII. Такой подход к генной терапии привлекателен тем, что печень постоянно вырабатывает белок FVIII. Тем не менее уровень последнего со временем падает. Повторное введение валоктокогена роксапарвовека (valoctocogene roxaparvovec) невозможно из-за выработки высоких титров нейтрализующих антител к AAV. Данная генная терапия не подходит для лечения младенцев или детей по причине высокой скорости роста печени в ходе взросления, что приведет к «вымыванию» эписомального трансгена FVIII во время последовательных раундов деления клеток печени. Кроме того, отмечается сайленсинг эписомальной экспрессии FVIII по причине синтетической природы его промотора.

    «Метаджиноми» — вместо размещения FVIII в высокорисковой эписомальной локации — предложила вставлять кассету с ДНК трансгена FVIII в «безопасное место» — в интрон гена альбумина; дальнейшая экспрессия FVIII происходит под действием сильного нативного промотора альбумина.

    Согласно доклиническим исследованиям другого фактора свертывания крови (фактора IX), подход привел к терапевтически значимой экспрессии с незначительным влиянием на системный уровень циркулирующего альбумина.

    Была продемонстрирована осуществимость нокин-подхода к гену FVIII на мышах и нечеловеческих приматах с использованием нескольких различных донорских кассет ДНК FVIII, при этом интеграция гена FVIII обеспечила экспрессию мРНК FVIII и терапевтически значимый уровень белка FVIII в крови.

    Программа редактирования генома при гемофилии A состоит из двух компонентов: липосомальных наночастиц (LNP), которые доставляют мРНК вместе с гидовой РНК (гРНК) в печень для производства высокоэффективной и специфической нуклеазы, осуществляющей точный разрез в локусе «безопасной гавани» гена альбумина, и аденовирусных векторов (AAV) для доставки донорской матричной ДНК FVIII, которая вставляется в место разреза нуклеазы в результате естественного процесса восстановления ДНК — негомологичного соединения концов.

     

    Сердечно-сосудистые заболевания

    Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются основной причиной смерти во всём мире. И хотя ССЗ не являются генетически обусловленными болезнями, существуют хорошо проверенные гены-мишени и сигнальные пути, таргетирование на которые позволяет создать соответствующее мощное лекарство на базе генного редактирования.

    Среди наиболее важных сигнальных путей, оказывающих заметную клиническую пользу как при гипертонии, так и при хронической сердечной недостаточности, следует отметить ренин-ангиотензин-альдостероновую систему (РААС), на которую успешно воздействует ряд важных лекарственных препаратов, включая ингибиторы ренина, ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента, блокаторы рецепторов ангиотензина и антагонисты альдостерона. Пероральные ингибиторы РААС, благотворно влияющие на артериальное давление, полезны также при ишемической болезни сердца (ИБС), диабетической нефропатии и других формах хронической почечной недостаточности. Однако постоянное 24-часовое ингибирование сигнального РААС-пути оказывается не всегда успешным.

    Согласно ряду исследований, в качестве лекарственной РААС-мишени для подавления имеет смысл выбрать вырабатываемый печенью ангиотензиноген (AGT). Подход позиционируется безопасным для снижения артериального давления без особых рисков гипотонии, гипокалиемии или острого поражения почек.

    Инновационное лечение гипертонии: один укол раз в квартал или полгода

    Артериальную гипертензию ждет серьезный фармакологический удар.

    «Метаджиноми» собирается осуществить нокдаун экспрессии AGT с помощью программируемых нуклеаз, чтобы добиться стойкого снижения артериального давления, причем после однократного лечения, то есть навсегда.

    На гуманизированных мышиных моделях с несколькими копиями человеческого гена AGT, интегрированными в случайные участки генома, было продемонстрировано, что введение экспериментальных препаратов привело к снижению уровней мРНК и белка AGT на 85–91% и 92–93% соответственно.

     

    Боковой амиотрофический склероз

    Основная причина бокового амиотрофического склероза (БАС) по-прежнему остается неизвестной. Тем не менее распространенной гистопатологической находкой являются неправильные агрегаты цитоплазматических белков, которые включают TDP-43. Поскольку TDP-43 представляет собой высококонсервативный ядерный РНК- и ДНК-связывающий белок, участвующий в процессинге РНК, клинические проявления БАС могут быть обусловлены как токсичными цитоплазматическими агрегатами TDP-43, так и нарушениями процессинга РНК в результате утраты у TDP-43 нормальных ядерных функций.

    brain
    «Реливрио» / «Албриоза»: новый препарат для лечения бокового амиотрофического склероза

    Amylyx Pharmaceuticals предложила смесь из натрия фенилбутирата и тауроурсодезоксихолевой кислоты.

    Прямое воздействие на TDP-43 не представляется возможным из-за его критической роли в процессинге РНК и других клеточных функциях. Вот почему «Метаджиноми» намерена разработать терапию, направленную на нокдаун гена ATXN2, который кодирует атаксин-2 — белок, являющийся мощным генетическим модификатором TDP-43.

  • Вылечить даже тяжелый рассеянный склероз, скорее всего, можно

    Вылечить даже тяжелый рассеянный склероз, скорее всего, можно

    Человеческий разум относится к новой идее так же,
    как тело относится к странному белку: он отвергает ее.

    Питер Медавар, биолог, нобелевский лауреат

    Новая научная истина торжествует не потому,
    что ее противники признают свою неправоту,
    просто ее оппоненты со временем вымирают,
    а подрастающее поколение знакомо с нею с самого начала.

    Макс Планк, физик, нобелевский лауреат

     

    Суть проблемы

    Прогрессирующий рассеянный склероз (PMS), как тяжелая форма этого демиелинизирующего заболевания, классифицируется на первично-прогрессирующий рассеянный склероз (PPMS) и вторично-прогрессирующий рассеянный склероз (SPMS). Первый справедлив при непрестанном ухудшении течения заболевания к моменту постановки его диагноза (15% случаев). Второй начинается как рецидивирующе-ремиттирующий рассеянный склероз (RRMS), который в конечном итоге превращается в SPMS у 80% пациентов.

    Предлагаемые фармотраслью лекарственные препараты, изменяющие течение рассеянного склероза (ПИТРС), в своем подавляющем большинстве направлены на терапию RRMS как самой распространенной его формы (85% первичных диагнозов). Так, «Окревус» (Ocrevus, окрелизумаб), продвигаемый «Рош» (Roche), декларирует, что подходит для терапии пациентов как с RRMS, так и PPMS. И если при рецидивирующе-ремиттирующем рассеянном склерозе окрелизумаб и правда является высокоэффективным ПИТРС (хотя отнюдь не безоговорочно), то в случае первично-прогрессирующего рассеянного склероза назвать «Окревус» действительно работающим пока не получается. Даже Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) одобрило окрелизумаб против PPMS с огромной натяжкой — очевидно, ввиду отсутствия каких-либо иных вариантов терапии. Впрочем, швейцарский фармгигант продолжает искать доказательства, что его моноклональное антитело против CD20 справляется и с PPMS.

    «Новартис» (Novartis) предлагает «Майзент» (Mayzent, сипонимод), который подходит пациентам с SPMS, но только в активной форме, то есть когда неумолимо прогрессирующее заболевание продолжает характеризоваться периодами рецидивов. Увы, столь же приемлемой эффективности, как при RRMS, сипонимод для пациентов с SPMS организовать не смог.

    «Окревус» и «Майзент» всего лишь незначительно сдерживают ухудшение инвалидизации при прогрессирующем рассеянном склерозе: крошечную 6-процентную разницу с плацебо никто и никогда не сможет назвать свидетельствующей о фундаментальном изменении течения заболевания.

    Согласно глобальной статистике, мировая популяция пациентов с рассеянным склерозом разбивается следующим образом: на долю RRMS приходится 57% больных, тогда как PMS охватывает 43%, включая 15% пациентов с PPMS и 28% с SPMS.

    Медицинская потребность в новых прорывных и, главное, высокоэффективных лекарственных препаратах для терапии прогрессирующего рассеянного склероза по-прежнему остается незакрытой. Сообщество врачей и пациентов мечтает либо об обращении инвалидизации вспять с последующим устойчивым поддержанием достигнутых успехов, либо о хотя бы стабильной остановке прогрессирования рассеянного склероза.

     

    Гипотеза, нашедшая ответ

    «Атара байотерапьютикс» (Atara Biotherapeutics) занимается проработкой теории, что вирус Эпштейна — Барр вплотную связан с развитием рассеянного склероза. И для этого она разрабатывает терапию на основе T-клеток, как критически важных компонентов иммунной системы организма, которые избирательно нацелены на специфические вирусные антигены. Таргетированные T-клетки распознают и устраняют из центральной нервной системы B-лимфоциты и плазматические клетки, инфицированные вирусом Эпштейна — Барр. Итогом модулирования патофизиологии рассеянного склероза становится предотвращение последующих аутоиммунных атак и открытие возможности для восстановления центральной нервной системы за счет механизмов ремиелинизации, дендритного и аксонального спраутинга (разрастания), синаптического ремоделирования.

    Достижения «Атара», подкрепленные данными клинических испытаний, подтверждают, что ее гипотеза верна. Более того, продемонстрированная клиническая результативность экспериментального лечения прогрессирующего рассеянного склероза невероятна, ведь удалось не всего лишь приостановить ухудшение течения и без того серьезного заболевания, но и развернуть его в обратную сторону.

    «Атара» осуществляет клиническую проверку ATA188 — T-клеточного иммунопрепарата, содержащего цитотоксические T-лимфоциты против специфических белковых антигенов вируса Эпштейна — Барр (EBV). Экспериментальный ATA188 является аллогенным и производится загодя культивацией in vitro:

    • У EBV-положительных иммунологически разнообразных и со здоровой иммунной системой доноров (не больных рассеянным склерозом) лейкоферезом собирают мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC). Из них выделяют T-клетки и B-клетки, которые затем культивируют и размножают.
    • B-клетки трансформируют в антигенпрезентирующие клетки (APC) путем их трансфектирования рекомбинантным аденовирусным вектором AdE1-LMPpoly, который кодирует CD8+ T-клеточные эпитопы, имеющие отношение к антигенам вируса Эпштейна — Барр — ядерному EBV-антигену 1 (EBNA1), латентному мембранному белку 1 (LMP1), латентному мембранному белку 2A (LMP2A).
    • T-клетки подвергаются воздействию APC, которые экспрессируют указанные EBV-антигены. Итогом становится стимуляция и размножение EBV-специфических CD8+ T-клеток — таргетированных цитотоксических T-лимфоцитов (CTL).
    • При внутривенном введении CTL пациентам с рассеянным склерозом они уничтожают персистирующие в центральной нервной системе EBV-инфицированные B-клетки, которые несут искомые EBV-антигены.

    Поскольку ATA188 является HLA-совместимым только частично, создается обширная библиотека криоконсервированных ATA188-препаратов: нужный отбирается для каждого пациента сообразно соответствию хотя бы по двум HLA-аллелям, общим для ATA188 и конкретного больного.

    Ранее «Атара» пробовала силы с аутологичным T-клеточным иммунопрепаратом ATA190, но в дальнейшем от него отказалась, поскольку производство осуществлялось отдельно под специфику каждого пациента, что весьма трудоемко и затратно.

     

    Возможная победа над прогрессирующим рассеянным склерозом

    Клиническое исследование EMBOLD (NCT03283826) фазы I/II проверяет безопасность и эффективность ATA188, назначаемого монотерапевтически один раз в год (несколькими циклами) на протяжении пяти лет взрослым EBV-положительным пациентам с прогрессирующими формами рассеянного склероза — первично-прогрессирующим или вторично-прогрессирующим.

    Испытание состоит из двух частей. Среди критериев включения: возраст 18–66 и 18–56 лет, балл по расширенной шкале степени инвалидизации (EDSS) 3,0–7,0 и 3,0–6,5 — соответственно для первой и второй частей.

    В первой части исследования (открытого, с эскалацией дозы) осуществлялась идентификация эффективной дозы ATA188: экспериментальный препарат назначался в четырех различных дозах — 5×106 клеток (когорта 1, n=6), 1×107 клеток (когорта 2, n=6), 2×107 клеток (когорта 3, n=6), 4×107 клеток (когорта 4, n=7). Исходный балл EDSS участников (n=25) составлял медианных 6,0 (4,0–6,5).

    Во второй части исследования (рандомизированного, двойного слепого, плацебо-контролируемого), набор в которое стартовал в июне 2020 года, будут определены изменения следующих конечных точек: EDSS, тест на время прохождения 25 футов (T25-FW), тест с девятью отверстиями и стержнями (9-HPT), МРТ-объемы шейного отдела спинного мозга и всего головного мозга, число очагов поражения головного мозга на T1-взвешенных МРТ-изображениях с контрастированием гадолинием и число новых или увеличивающихся очагов на T2-взвешенных МРТ-изображениях.

     

    Начало положено

    «Атара» поделилась собранными за 6 и 12 месяцев данными изучения ATA188 в первой части испытания. Для этого был установлен композитный показатель терапевтической эффективности как стабильное улучшение статуса инвалидизации (SDI). Выход к SDI подтверждался при минимально клинически значимом улучшении балла EDSS или времени T25-FW, фиксируемом за период двух последовательных оценок: например, по прошествии трех, а затем шести месяцев.

    Заявлено, что с увеличением дозы ATA188 ответ на лечение углублялся. Так, по одному пациенту в когортах 1 и 2 и два пациента в когорте 3 показали SDI за период 6 месяцев, который сохранялся и по истечении 12 месяцев. Два участника в когорте 4 максимальной дозы также продемонстрировали SDI за 6 месяцев, но их 12-месячные данные еще не собраны. Основной вклад в достижение SDI поступил со стороны улучшения балла EDSS.

    «Атара» провела еще одну оценку терапевтической результативности ATA188 при помощи композитной конечной точки, разработанной так, чтобы выявлять ранние признаки эффективности. Речь идет об априорной классификации клинических исходов, оцениваемых по семи шкалам, справедливым для симптомов, функциональных возможностей и степени инвалидизации пациентов с рассеянным склерозом. От лечения требовался выход к статусу клинического улучшения, который подтверждался, если за период двух и более последовательных оценок фиксировались улучшения, продолжающие сохраняться хотя бы на минимальном для клинической значимости уровне.

    Шкалы следующие:

    • шкала тяжести усталости (FSS): минимальное клиническое улучшение составляло −0,7 балла;
    • шкала влияния рассеянного склероза (MSIS-29) [домен физических возможностей]: −8 баллов;
    • T25-FW: −20%;
    • 9-HPT: −20%;
    • субъективный опросник способности передвигаться (MSWS-12): −8 баллов;
    • EDSS: −1 балл (при исходном EDSS 3–5 баллов) и −0,5 балла (EDSS 5,5–7,0);
    • острота зрения (VA) [по шкале LogMAR]: изменение минимум на −0,1 в каждом глазу.

    Подтверждено, что длительно сохраняющаяся заявленная терапевтическая эффективность ATA188 напрямую коррелирует с увеличением дозы препарата.

    По итогам «Атара» отобрала дозовую когорту 3 для изучения в части 2 клинического испытания. Не исключено, впоследствии подключатся участники из когорты 4 максимальной дозы — как только будут готовы их 12-месячные данные.

    Профиль безопасности ATA188 характеризуется отсутствием дозолимитирующей токсичности и фатальных побочных реакций. Все отрицательные явления, связанные с терапией, носили легко-умеренную степень выраженности. И хотя один пациент столкнулся с тяжелой побочной реакцией, приведшей к выходу из клинического исследования, она проявилась на фоне продолжающихся симптомов инфекции верхних дыхательных путей и возможной стоматологической инфекции. Насморк — единственная побочная реакция, зафиксированная у более чем одного испытуемого.

    ATA188 не оказал клинически значимого эффекта на выработку цитокинов, в том числе не привел к синдрому выброса цитокинов.

     

    Клиническая проверка ATA188 против рассеянного склероза: обновленные данные #1 [август 2020 года]

    «Атара», продолжающая сбор клинических данных ATA188, нашла подтверждение, что повышенные дозы экспериментального препарата отражаются более высокой пропорцией пациентов, демонстрирующих стабильное улучшение статуса инвалидизации.

    Среди ответивших на лечение подобные улучшения проистекают главным образом за счет снижения балла по шкале EDSS: с течением времени терапевтическая эффективность отражается улучшением результатов прохождения тестов T25-FW и 9-HPT.

    Отмечаются благотворные тенденции к улучшению результатов тестов FSS, MSIS-29, MSWS-12.

    Данные еще более длительных наблюдений за 6 пациентами засвидетельствовали следующее:

    • 3 участника (из достигших статуса SDI после 6 и 12 месяцев) сохранили его и по прошествии 15 месяцев;
    • 1 пациент добрался до SDI по истечении 24 месяцев;
    • 1 испытуемый оставался в статусе SDI в период 6–18 месяцев.

    Выводы, сделанные «Атара», таковы:

    • накопленные данные клинической проверки ATA188 подтвердили безопасность подобного экспериментального лечения прогрессирующих форм рассеянного склероза;
    • эффективность терапии напрямую коррелирует с ростом дозы препарата;
    • пациенты, по прошествии 12 месяцев продемонстрировавшие стабильное улучшение статуса инвалидизации, характеризуются улучшениями показателей усталости, физических функций и способности передвигаться, если сравнивать с теми испытуемыми, которые не достигли указанного статуса SDI;
    • если пациент зафиксировался в статусе SDI на каком-то определенном временном этапе терапии, он в нем остается и дальше;
    • несмотря на клинические успехи ATA188, экспериментальная терапия прогрессирующих форм рассеянного склероза всё равно нуждается в более тщательной проверке, охватывающей большее число пациентов.

     

    Клиническая проверка ATA188 против рассеянного склероза: обновленные данные #2 [октябрь 2020 года]

    Дальнейшие наблюдения за испытуемыми доказали, что решающее терапевтическое значение имеет повышенная доза ATA188. Так, выход к статусу SDI в двух когортах высоких доз (когорты 3 и 4) оказался справедливым для 42% (n=5/12) и 50% (n=6/12) участников — по прошествии соответственно 12 и 15 месяцев.

    Часть 2 клинического исследования изначально ориентировалась на дозовую когорту 3, однако после того как когорта 4 (наивысшая доза) отметилась сходной или даже лучшей результативностью лечения, принято решение переключить всех участников именно на нее.

     

    Клиническая проверка ATA188 против рассеянного склероза: обновленные данные #3 [август 2021 года]

    Обновленные результаты лечения прогрессирующих форм рассеянного склероза при помощи ATA188 среди пациентов, наблюдения за которым велись вплоть до 39 месяцев кряду, позволили сделать следующие выводы.

    Во-первых, большинство пациентов, достигших SDI в любой временной точке, в последующим сохранили этот статус. Выход к SDI обусловлен, как правило, устойчивым улучшением балла EDSS.

    Во-вторых, получены доказательства возможной ремиелинизации. Так, пациенты с устойчивым улучшением балла EDSS продемонстрировали большее (по сравнению с теми, у кого не было явных улучшений балла EDSS) увеличение отношения переноса намагниченности (MTR) как ключевого биомаркера статуса миелинизации. Другими словами, структурные изменения тканей головного мозга, свидетельствующие о ремиелинизации, вполне могут быть той самой движущей силой, которая благотворно проявляется ослаблением степени инвалидизации при прогрессирующем рассеянном склерозом.

    В-третьих, по мере лечения пациенты показали устойчивое улучшение балла EDSS, что позволяет смело говорить не только о замедлении прогрессирования рассеянного склероза, но и о обращении заболевания вспять.

    В-четвертых, не выявлено каких-либо серьезных проблем с безопасностью и переносимостью ATA188.

    Как бы то ни было, несмотря на обнадеживающие результаты экспериментального лечения прогрессирующих форм рассеянного склероза, их необходимо подтвердить в рандомизированном плацебо-контролируемом клиническом испытании. Этим «Атара» и занимается: соответствующие промежуточные данные из части 2 исследования EMBOLD будут получены в первой половине 2022 года.

    «Атара» запланировала два опорных клинических испытания фазы III, которые изучат ATA188 среди двух популяций пациентов: с неактивным вторично-прогрессирующим рассеянным склерозом и неактивным первично-прогрессирующим рассеянным склерозом. Для первой популяции одобренной терапии не существует, для второй — таковая характеризуется весьма слабой эффективностью.

     

    Более чем надежда

    И хотя развитие рассеянного склероза, вероятно, подталкивается не одним причинным фактором, вирус Эпштейна — Барр является единственным известным на сегодняшний день фактором риска, в обязательном порядке необходимым для манифестации заболевания. Доказано, что 100% пациентов с рассеянным склерозом подверглись воздействию EBV. При этом EBV-инфицированные клетки, особенно B-клетки памяти, ставшие ввиду вирусного заражения бессмертными, играют, есть мнение, важнейшую роль в иммунном каскаде, ответственном за рецидивирующие и прогрессирующие формы рассеянного склероза. Успехи существующей фармакотерапии, которая истощает пул всех периферических B-клеток, лишний раз свидетельствует о ключевой позиции этих клеток в патофизиологии рассеянного склероза. Показана оправданность продолжения экспериментов с терапией рассеянного склероза при помощи ATA188 — цитотоксическими T-клетками, селективно таргетированными против EBV-инфицированных B-клеток и плазматических клеток, как циркулирующих в организме, так и персистирующих в центральной нервной системе.

    Некоторые наблюдения таковы, что эффективность ATA188 в отношении улучшения статуса инвалидизации зависит, кажется, от исходного балла по шкале EDSS: чем запущеннее заболевание, тем меньше (или медленнее) проявляется целебная сила лечения. И всё же улучшение показателя EDSS даже на один балл — уже примечательно. Ведь если пациент, к примеру, изначально передвигался с тростью, то после терапии ATA188 он обрел способность самостоятельной ходьбы.

    Клинические испытания аутологичного ATA190, от которого «Атара» отказалась ввиду производственных сложностей, в своей время указали на тот факт, что у пациентов с тяжелой неврологической инвалидностью (исходный балл EDSS 8,0) необратимые аксональная дегенерация и потеря нейронов ограничивают терапевтические возможности для улучшений, даже если аутоиммунные атаки на центральную нервную систему предотвращены при помощи EBV-специфической T-клеточной терапии. Тем не менее и у таких запущенных больных лечение благоприятно отразилось на общем состоянии, физических и когнитивных способностях, а также в физиологической плоскости, включая работу мочевого пузыря, остроту зрения, спастичность.

    Имеющиеся лекарственные препараты способны лишь слегка придержать ухудшение прогрессирующего рассеянного склероза — им не по силам остановить или обратить заболевание вспять. Если ATA188 добьется этого в ходе строго контролируемой части 2 клинического испытания, нас ждет эволюция в парадигме лечения прогрессирующей и других форм рассеянного склероза.

     

    Рассеянный склероз и вирус Эпштейна — Барр

    Считается, что генетические и внешние факторы вносят определенный вклад в риск развития рассеянного склероза — хронического воспалительного демиелинизирующего заболевания центральной нервной системы, вызывающего прогрессирующую инвалидизацию. За последние четыре десятка лет появилось всё больше доказательств, что вирус Эпштейна — Барр (EBV) играет существенную роль в развитии рассеянного склероза. Предположение подкреплено рядом независимых исследований, указывающих на поголовное присутствие инфекции у пациентов и наличие высоких титров сывороточных антител против EBV как в ходе клинического течения рассеянного склероза, так и до его манифестации.

    Вирус Эпштейна — Барр (EBV) и рассеянный склероз: гипотеза аутореактивных B-клеток. Изображение: Trends Mol Med. 2020 Mar; 26(3): 296–310.

    Вирус Эпштейна — Барр, или вирус герпеса человека 4 типа (HHV-4), во многих отношениях является уникальным. Так, в целях колонизации организма он заражает B-лимфоциты, активирует и способствует их клональному размножению, а затем на протяжении всей жизни человека персистирует латентной инфекцией в B-клетках памяти, несущих фенотип покоящихся клеток. Вирус, переключаясь с латентной (спящей) на литическую (репликационную) форму посредством модуляции своих ядерных генов, латентных мембранных белков (LMP) 1, 2A и 2B и вирусного предраннего белка BZLF1 (ZEBRA), реактивируется в плазматических клетках и эпителиальных клетках миндалин, организуя собственную передачу другим организмам через слюну и генитальные выделения. Несмотря на то что этим ДНК-двухцепочечным гамма-герпесвирусом заражено приблизительно 95% взрослого населения планеты, число EBV-инфицированных клеток в организме удерживается под строгим иммунным контролем, в том числе EBV-специфическими цитотоксическими T-лимфоцитами CD8+, которые уничтожают пролиферирующие и литически инфицированные клетки.

    В ряде случаев иммунологический надзор над EBV ослабевает, что отражается развитием различных болезней. Известно, что вирус Эпштейна — Барр является причиной инфекционного мононуклеоза. Он ассоциирован с определенными онкологическими заболеваниями, включая лимфому Ходжкина, лимфому Беркитта, рак желудка, карциному носоглотки. Вирус Эпштейна — Барр связан с детскими расстройствами вроде синдрома Алисы в стране чудес и острой мозжечковой атаксии. Есть мнение, что он усиливает риски развития аутоиммунных патологий, в том числе дерматомиозита, системной красной волчанки, ревматоидного артрита, синдрома Шегрена.

    Касательно рассеянного склероза, считается, что у восприимчивых хозяев EBV-инфекция наделяет зараженные аутореактивные B-клетки аномальной способностью к выживаемости и пролиферации. Такие латентно инфицированные клетки аккумулируются в лимфоидных структурах и органах-мишенях, затрагиваемых при этом заболевании. Если речь идет о головном мозге, это приводит к постоянному синтезу аутоантител, которые атакуют и повреждают олигодендроциты, миелин и нейроны.

    Анализ посмертных образцов головного мозга пациентов с рассеянным склерозом и здоровых лиц (без неврологических заболеваний), проведенный «Атара», выявил, что, несмотря на признаки инфицирования вирусом Эпштейна — Барр в обеих группах, EBV-положительные иммунные клетки более распространены и густо населяют головной мозг именно больных рассеянным склерозом.

    Специалисты «Атара», обратившиеся к иммуногистохимии, гибридизации in situ, оптической микроскопии и полуколичественному анализу, изучили посмертные биоптаты головного мозга больных рассеянным склерозом (n=17) и здоровых лиц (n=9). Наличие LMP-1 было установлено в 93% биоптатов группы рассеянного склероза и 78% контрольной группы, притом что в первой отмечено существенно большее присутствие плазматических клеток CD138+ и LMP-1-обогащенных клеточных популяций.

    Что примечательно, 78% хронических областей мозгового поражения при рассеянном склерозе и только 33,3% образцов здорового мозга содержали плазматические клетки CD138+ в паренхиме, где быть их не должно. Не исключено, EBV-инфекция ответственна за экстравазацию последних из сосудистой сети головного мозга, наделяя воспалительный процесс постоянством.

    В 46% и 44% тканях соответственно был найден белок BZLF1, притом что в случае биоптатов с рассеянным склерозом он находился преимущественно в связке с областями хронического поражения головного мозга. Считается, что BZLF1 способен подавлять выработку интерлейкина 2 (IL-2) и интерлейкина 6 (IL-6). Помимо участия в B-клеточном созревании IL-6 важен для нейро- и генеза олигодендроглии в нормальных условиях и после повреждения.

    Кроме того, в 85% образцах головного мозга пациентов с рассеянным склерозом отмечалось куда более выраженное присутствие иммунных клеток с EBV-кодируемыми малыми РНК-1 (EBER1), нежели в биоптатах здоровых лиц.

     

    Дополнительные свидетельства

    Антивирусную терапию рассеянного склероза исповедует швейцарско-французская «Джинейро» (GeNeuro) со своим экспериментальным темелимабом (temelimab). Согласно одной из гипотез, некоторые вирусы способны дать толчок к развитию рассеянного склероза.

    Так, ассоциированный с рассеянным склерозом ретровирус (MSRV), относящийся к патогенному W-семейству эндогенных вирусов человека (pHERV-W), может трансактивироваться внешними факторами, например вирусом герпеса человека 6-го типа (HHV-6) или вирусом Эпштейна — Барр. Итогом становится генерация патогенного оболочечного белка MSRV-Env, который, сверхактивируя эндогенный толл-подобный рецептор 4 (TLR4), запускает провоспалительный каскад и подавление ремиелинизации.

    Темелимаб (GNbAC1) — рекомбинантное гуманизированное моноклональное антитело, избирательно таргетированное на внеклеточный домен MSRV-Env в целях его нейтрализации.

     

    Дополнительные материалы

    Phase I study of ATA188, an off-the-shelf, allogeneic Epstein-Barr virus-targeted T-cell immunotherapy for progressive forms of multiple sclerosis. [PDF]

    Atara Biotherapeutics. Investor Presentation. March 1, 2021. [PDF]

    Corporate and ATA188 Data Update September 11, 2020. [PDF]

    ATA 188 Data Update. May 26, 2020. [PDF]

    Epstein–Barr Virus in Multiple Sclerosis: Theory and Emerging Immunotherapies. Trends Mol Med. 2020 Mar;26(3):296-310. [источник] [PDF]

    Molecular signature of Epstein-Barr virus infection in MS brain lesions. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm. 2018 Jun 7;5(4):e466. [источник] [PDF]

  • Масло и семена черного тмина от коронавируса. Лечение и профилактика

    Масло и семена черного тмина от коронавируса. Лечение и профилактика

    В черном тмине излечение от любой болезни, кроме смерти.
    Хадисы.

    Главное

    Nigella sativa, или медицина пророка Мухаммеда, прекрасно справляется с лечением и профилактикой коронавирусной инфекции COVID-19.

    Масло и семена черного тмина ускорят излечение от коронавируса SARS-CoV-2, предупредят развитие тяжелого ковида и даже помогут не умереть от этой инфекции. Черный тмин, назначаемый в профилактических целях, не даст развиться симптоматическому ковиду.

    Черный тмин особенно востребован в нынешних условиях, когда по сути нет широкодоступных лекарств, безоговорочно эффективных против коронавируса, а население не спешит поголовно вакцинироваться.

     

    Черный тмин при коронавирусе: механизм действия

    Ограниченный ассортимент лекарственных средств, эффективных против коронавирусной инфекции COVID-19, заставляет фармацевтическую отрасль продолжать поиск новых препаратов, которые с должными результатами справляются с заражением коронавирусом SARS-CoV-2 и последствиями, им вызываемыми.

    Так, в целях лечения ковида рассматриваются растительные препараты, содержащие ряд биологически активных молекул. В частности, черный тмин (Nigella sativa), также известный как лекарство пророка Мухаммеда, предлагается в качестве потенциального фитопрепарата благодаря нескольким фармакологическим свойствам, включая противовоспалительное, противовирусное и иммуномодулирующее действие, особенно востребованным в условиях пандемии COVID-19. [1] [2]

    В состав черного тмина, популярной специи с высокой лекарственной ценностью, входят несколько активных соединений, включая тимохинон. [3] Профиль безопасности тимохинона задокументирован во многих клинических исследованиях, включая испытания терапии астмы.[4] Систематический обзор рандомизированных клинических исследований (РКИ), в которых использовался черный тмин, не выявил серьезных отрицательный последствий для печеночной и почечной функции. [5] Несколько доклинических и клинических исследований подтвердили противовирусную активность черного тмина против ряда вирусов, включая вирусы гриппа, гепатита C и ВИЧ, цитомегаловирус. [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13] [14] Исследование in vitro показало, что нагрузка коронавируса SARS-CoV-1 снизилась при использовании черного тмина. [8]

    Некоторые соединения в составе черного тмина продемонстрировали потенциальное ингибирование репликации коронавируса SARS-CoV-2 в моделях in silico. [15]

    Так, нигеллидин (nigellidine) в составе черного тмина, связываясь с активными/каталитическими сайтами вирусного неструктурного белка 3 (Nsp3) коронавируса и воспалительных/апоптотических сигнальных молекул организма-хозяина, таких как Fas-рецептор (FasR) и рецепторы 1 и 2 фактора некроза опухоли (TNFR1/TNFR2), подавляет репликацию/транскрипцию SARS-CoV-2 и сдерживает клеточную смерть, опосредующую тканевое повреждение. [16]

    Дитимохинон (dithymoquinone) в составе черного тмина, связывается с 3C-подобной протеазой (3CLpro), необходимой коронавирусу для репликации, и неструктурным белком 15 (Nsp15), отвечающим в том числе за подавление врожденного иммунитета посредством инфицирования макрофагов и уклонения от иммунной системы. [17]

    Альфа-хедерин (α-hederin), дитимохинон, нигеллицин (nigellicine) и нигеллидин в составе черного тмина проявляют высокое сродство связывания в отношении РНК-зависимой РНК-полимеразы (RdRp) коронавируса, критически необходимой для его беспроблемной репликации. [18]

    Показана ингибирующая активность нигелламина (nigellamine) A2 и A3 (NA2/NA3) в составе черного тмина против 3CLpro. [19]

    Установлено, что оксид кариофиллена (caryophyllene oxide) в составе черного тмина характеризуется высокой аффинностью связывания с 3CLpro и RdRp, а также вирусными неструктурными белками 3 и 9 (Nsp3/Nsp9). При этом альфа-бергамотен (α-bergamotene) проявляется сродство к полипротеину репликазы 1a (RP1A), а бета-бисаболен (β-bisabolene) — антигеотензинпревращающему ферменту 2 (ACE2). [20]

    Иммунная система включает в себя сложную клеточную систему, которая защищает от нежелательных вторжений патогенов. Однако для правильного функционирования необходимо скоординированное действие между ее элементами. [21] В ряде исследований было показано, что черный тмин проявляет иммуностимулирующее действие посредством индукции множества клеточных медиаторов и иммунных реакций, нацеленных на уничтожение инфекций. [22] [23] [24] [25] Напротив, в исследованиях воспалительных заболеваний черный тмин засвидетельствовал противовоспалительную и иммуномодулирующую активность, снижая уровень провоспалительных медиаторов. [25] Сообщалось об обезболивающих, жаропонижающих и бронходилатационных свойствах черного тмина. [26] [27] [28].

     

    Масло черного тмина против ковида: целительный эффект Nigella sativa

    В начале ноября 2021 года «Новатек фармасьютикалс» (Novatek Pharmaceuticals) сообщила об успешности клинической проверки перорального препарата TQ Formula среди амбулаторных пациентов с коронавирусной инфекцией COVID-19, вызванной новым коронавирусом SARS-CoV-2.

    Пероральный TQ Formula представляет собой запатентованную рецептуру масла черного тмина (Nigella sativa) в таблетках с кишечнорастворимой оболочкой и выверенной 2-процентной концентрацией тимохинона (thymoquinone). Лабораторные исследования установили, что TQ Formula блокирует проникновение различных вариантов SARS-CoV-2 в клетки посредством ингибирования ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2).

    Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) проведет встречу с «Новатек», чтобы наверняка выяснить, разрешать ли применение TQ Formula для лечения негоспитализированных пациентов с COVID-19.

    Клиническое исследование BOSS-COVID-19 (NCT04914377) фазы II (рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, многоцентровое) охватило негоспитализированных взрослых пациентов (n=60) из США с лабораторно подтвержденным диагнозом коронавирусной инфекции COVID-19, протекающей с легко-умеренной степенью тяжести.

    Участникам назначали плацебо или 3 г TQ Formula (3 капсулы по 500 мг дважды в день) — на протяжении 14 дней на фоне стандартного лечения.

    Применение TQ Formula в сравнении с плацебо обеспечило значительно более быстрое уменьшение общего бремени симптомов (p=0,006), определяемого как продолжительность и тяжесть симптомов COVID-19 с 1-го по 14-й день, согласно пациентскому опроснику при гриппе и гриппоподобных заболеваниях Flu-PRO Plus, модифицированному под особенности ковида.

    Испытуемые, получавшие TQ Formula, продемонстрировали значительный рост популяции цитотоксических T-лимфоцитов CD8+ (p=0,038) и T-хелперов CD4+ (p=0,025), а также тенденцию к ускоренному снижению вирусной нагрузки (p=0,18). Это свидетельствует о том, что черный тмин поддерживает восстановление иммунной системы при коронавирусе.

    Профиль безопасности TQ Formula благоприятствовал: экспериментальное лечение переносилось очень хорошо, серьезных нежелательных явлений не наблюдалось.

     

    Масло черного тмина ускорит излечение от коронавируса

    В середине августа 2021 года стали известны результаты клинического исследования NCT04401202 фазы II (рандомизированного, открытого, плацебо-контролируемого), которое привлекло взрослых пациентов (n=183) из Саудовской Аравии с лабораторно подтвержденным диагнозом коронавирусной инфекции COVID-19, протекающей с легкой степенью тяжести.

    Испытуемые, проходившее стандартную терапию, дополнительно получали плацебо или масло черного тмина — на протяжении 10 дней. Экспериментальное лечение было представлено фирменными капсулами Marnys Cuminmar (с 1,28-процентным содержанием тимохинона), которые назначались по 500 мг два раза в день.

    Клиническое выздоровление, под которым понималось отсутствие симптомов ковида в период 14 дней после рандомизации, было зафиксировано для 62% (n=54/87) пациентов в группе черного тмина — против 36% (n=31/86) больных в контрольной группе (p=0,001).

    Назначение черного тмина привело к сокращению периода времени, потребовавшегося для выздоровления: усредненных 10,7±3,2 дня — против 12,3±2,8 дня (p=0,001).

    Итак, добавление масла черного тмина к стандартному лечению COVID-19 снизило риск госпитализации на 75% — относительный риск (risk ratio, RR) 0,25 (p=0,37), а также снизило риск невыздоровления на 43% — RR 0,57 (p<0,001).

     

    Семена черного тмина для профилактики ковида

    В январе 2021 года было продемонстрировано профилактическое значение черного тмина в задаче предотвращения развития коронавирусной инфекции COVID-19 у лиц в группе риска.

    Клиническое испытание (нерандомизированное, открытое), проведенное в Ираке, пригласило взрослых добровольцев (n=376), которые были стратифицированы сообразно уровню риска заражения коронавирусом SARS-CoV-2.

    Уровень риска был установлен следующим образом: высокий риск — работа в системе здравоохранения, проживание с инфицированным членом семьи, промежуточный риск — тесный контакт с населением (школа, рабочие места с высокой плотностью сотрудников, розничная торговля с большим объемом продаж), низкий риск — минимальный профессиональный контакт с населением и сотрудниками.

    Одной группе участников назначали семена черного тмина (40 мг/кг) ежедневно до завтрака, вторая группа не получала ничего.

    Установлено, что прием семян черного тмина на 62% снижает риск развития симптоматического ковида — относительный риск (risk ratio, RR) 0,38 (p<0,001). При этом, однако, в группе высокого риска черный тмин не оказал какого-либо благотворного защитного эффекта, тогда как в группах промежуточного и низкого риска он обеспечил снижение риска заражения коронавирусом до 17,6% и 0,0%.

     

    Семена черного тмина предупредят развитие тяжелого ковида

    В январе 2021 года были опубликованы результаты клинического испытания (рандомизированного, открытого, плацебо-контролируемого), проведенного в Ираке и охватившего пациентов (n=419) с лабораторно-подтвержденным диагнозом коронавирусной инфекции COVID-19.

    Участникам назначали либо стандартную терапию, либо ее же с добавлением семян черного тмина (40 мг/кг) один раз в день — на протяжении 14 дней.

    Экспериментальное лечение обеспечило снижение риска смерти на 96% — относительный риск (risk ratio, RR) 0,04 (p=0,001), а также снижение риска протекания ковида в тяжелой форме на 93% — RR 0,07 (p<0,001).

     

    Семена черного тмина помогут не умереть от коронавируса

    В начале ноября 2020 года были подведены итоги клинического исследования NCT04347382 фазы III (рандомизированного, двойного слепого, плацебо-контролируемого, многоцентрового), пригласившего взрослых пациентов (n=313) из Пакистана с лабораторно подтвержденным диагнозом коронавирусной инфекции COVID-19, протекающей в умеренно-тяжелой форме.

    Среди критериев исключения: полиорганная недостаточность, необходимость в кислородной поддержке, хронические заболевания (кроме сахарного диабета и гипертонии).

    Испытуемым, которые получали стандартное лечение ковида, дополнительно назначали плацебо или мед (1 г/кг/в день) с семенами черного тмина в капсулах (80 мг/кг/в день), разделенные на два-три приема, — на протяжении максимум 13 дней.

    Экспериментальное лечение привело к ускорению клиренса коронавируса SARS-CoV-2 на 4 дня. Так, в подгруппе пациентов с умеренной тяжестью течения COVID-19 это произошло за 6 дней — против 10 дней в контрольной группе (отношение рисков [hazard ratio, HR] 5,53 [95% ДИ: 3,76–8,14]; p<0,0001). В подгруппе больных с тяжелой формой COVID-19 это случилось за 8,5 дней — против 12 дней в группе плацебо (HR 4,32 [95% ДИ: 2,62–7,13]; p<0,0001).

    Добавление меда с семенами черного тмина к стандартному лечению ковида ускорило облегчение симптомов заболевания приблизительно вдвое: за 4 дня против 7 дней в подгруппе испытуемых с умеренным течением инфекции (HR 6,11 [95% ДИ: 4,23–8,84]; p<0,0001) и за 6 дней против 13 дней в подгруппе с тяжелым течением (HR 4,04 [95% ДИ: 2,46–6,64]; p<0,0001).

    На 6-й день лечения, согласно 7-балльной клинической оценочной шкале, назначение меда с семенами черного тмина обеспечило восстановление нормальной физической активности среди 64% пациентов в подгруппе умеренного течения ковида — против 11% (отношение шансов [odds ratio, OR] 0,07 [95% ДИ: 0,03–0,13]; p<0,0001), выписывание из больницы 50% пациентов в подгруппе тяжелого течения ковида — против 3% (OR 0,03 [95% ДИ: 0,01–0,09]; p<0,0001).

    За 30-дневный период наблюдений за тяжелыми случаями ковида летальность в группе экспериментального лечения была в 4 раза ниже относительно группы плацебо: скончались 4% больных — против 19% (OR 0,18 [95% ДИ: 0,02–0,92]; p=0,029).

    Итак, добавление меда с семенами черного тмина к стандартной терапии COVID-19 привело к снижению риска смерти на 82% (без учета тяжести ковида) — относительный риск (risk ratio, RR) 0,18 (p=0,01). При этом среди пациентов с ковидом в умеренной форме риск летального исхода снизился на 67% (RR 0,33; p=0,49), а при тяжелой форме ковида — на 79% (RR 0,21; p=0,03).

    Экспериментальное лечение обеспечило снижение риска невыздоровления на 84% (RR 0,16; p<0,001) при умеренном течении заболевания и на 75% (RR 0,25; p<0,001) при тяжелом, а также риска отсутствия вирусологического излечения на 82% (RR 0,18; p<0,001) при умеренном течении заболевания и на 77% (RR 0,23; p<0,001) при тяжелом.